تلوث زراعه الأنسجه و 7 خطوات سهله للوقایه

التلوث مره أخرى!

زراعه الأنسجه عملیه طویله وشاقه وتشعر بالانزعاج عندما تغزو الفطریات أو البکتیریا ثقافاتنا الحبیبه.

تتطلب زراعه الخلایا فی المختبرات الکثیر من الجهد ، من التحضیر المتوسط ​​ونقل الخلایا إلى الصیانه الدوریه. لسوء الحظ ، إذا أصیبت الخلایا وفقدت الثقافات ، فسیؤدی ذلک إلى إهدار الکثیر من الوقت والجهد والمال. إذا کنت لا تعرف کیف یصاب محصولک ونوع التلوث به ، فإن المشکله تصبح أکبر!

إنه أمر مدمر ولیس لدیک خیار سوى تکرار التجارب لحفظ بحثک.

أنواع تلوث زراعه الأنسجه

یصنف تلوث زراعه الأنسجه إلى مجموعتین: التلوث الکیمیائی والتلوث البیولوجی.

التلوث الکیمیائی

یحدث التلوث الکیمیائی بسبب وجود أی مکونات غیر حیه تؤثر سلبًا على نمو محصولک.

مصادر وأنواع التلوث الکیمیائی هی:

وسط المزرعه: یحتوی وسط استنبات الخلیه على العناصر الغذائیه والکواشف والماء ، وهی المصادر الرئیسیه للتلوث.

المصل: مقوی مغذی لزراعه الخلایا. یحتوی على البروتین والهرمونات وبعض عوامل النمو التی تحفز نمو الأنسجه. ومع ذلک ، فإن التغیرات فی ترکیز الهرمونات وعوامل النمو یمکن أن تکون سامه لمزارع الخلایا.

الذیفان الداخلی: هو منتج ثانوی للبکتیریا سالبه الجرام ویوجد فی الماء أو المصل أو مکونات المزرعه الأخرى. یمکن تحدیده بواسطه طریقه Limulus Embocyte Lysate (LAL).

الأنابیب البلاستیکیه وخزانات التخزین: یتم إطلاق المخلفات الکیمیائیه (المنظفات أو المطهرات) الموجوده فی حاویات التخزین غیر النظیفه فی البیئه عند نقلها إلى الحاویات. بالإضافه إلى ذلک ، یمکن أن تؤثر الملینات أیضًا على نمو الثقافه.

ضوء الفلورسنت: یمکنه تنشیط بعض مکونات الوسائط مثل الریبوفلافین والتریبتوفان ، التی تطلق بیروکسید الهیدروجین والجذور الحره السامه للخلایا.

التلوث البیولوجی

یحدث التلوث البیولوجی بسبب وجود کائنات حیه فی الثقافه. وتشمل هذه الکائنات البکتیریا التی یسهل التعرف علیها ، والخمائر ، والعفن ، أو الفیروسات ، والبروتوزوا ، والمیکوبلازما.

البکتیریا والخمائر والعفن موجوده فی کل مکان فی الطبیعه. لذلک ، یمکنهم بسهوله التسلل والاستعمار والنمو فی مزارع الخلایا. تستخدم المضادات الحیویه لمنع البکتیریا من النمو ، ومع ذلک ، لا یزال بإمکان بعض السلالات المقاومه أن تنمو.

هناک بکتیریا صغیره جدًا أو بطیئه النمو داخل الخلایا یصعب اکتشافها أثناء فحوصات المزرعه الروتینیه. یمکن أن تسبب أضرارًا جسیمه للعدید من المحاصیل.

من الصعب تحدید الفیروسات والطفیلیات والمیکوبلازما الموجوده داخل الخلایا بطبیعتها. فهی لا تدمر ثقافه الخلیه بأکملها فحسب ، بل إنها تشکل أیضًا مخاطر محتمله على صحه الإنسان.

ما هی أفضل طریقه لمنع التلوث؟

لتجنب التلوث وتوفیر ثقافتک وتجاربک ، یجب علیک اتباع الاحتیاطات الوارده أدناه “قبل وأثناء” تجارب زراعه الأنسجه:

ارتدِ القفازات ومعطف المختبر ونظّم نفسک: هل فکرت یومًا أنک قد تلوث خلایاک المزروعه بنفسک؟ نعم هذا صحیح! جسم الإنسان ملیء بالبکتیریا. لذلک ، من الأفضل ارتداء القفازات ومعطف المعمل. یجب حفظها داخل المختبر وتنظیفها بانتظام. یمکنک أیضًا سرد الأشیاء التی تحتاج إلى أخذها إلى غرفه المنشأه وسیساعدک هذا على إنهاء تجاربک فی خطوه واحده.

استخدم مواد کیمیائیه عالیه الجوده: استخدم فقط وسائط وأمصال أصلیه عالیه الجوده فی تجاربک. أیضا ، یجب تعقیم الماء ووسط الثقافه بشکل جید.

تعقیم معدات المختبر: دائمًا معدات مختبر الأوتوکلاف ، مثل رؤوس الماصه ، وحاویات التخزین ، والأکواب ، والملقط ، إلخ. قبل ذلک ، تأکد من أن أجهزتک قابله للتعقیم!

تحقق من المرافق: قم بتنظیف وتعقیم المرفق أو الغرفه التی تزرع فیها الخلایا بانتظام. تحقق أیضًا من التدفق الصفحی والحاضنات. نظف السطح الرقائقی والمعدات الأخرى بنسبه 70٪ کحول قبل إجراء الاختبار.

فحص الخلایا المستورده: إذا کنت تقوم باستیراد خلایا من شرکه أو مختبرات أخرى ، فمن الأفضل فحص الخلیه عن طریق استزراعها لمده أسبوعین على الأقل. یساعدک هذا على توفیر الکواشف والجهد قبل زراعه الخلایا على نطاق واسع.

تجنب تعریض الخلایا لبیئات غیر معقمه: حاول دائمًا الاحتفاظ بالخلایا فی بیئه معقمه. یجب أن یکون نقل الخلایا من الحاضنه إلى الغطاء سریعًا. إذا کانت خلایاک خارج المنزل لفتره طویله ، فاحتفظ بها فی غطاء آخر. سیساعدک هذا فی الحفاظ على محاصیلک الأخرى أیضًا.

افحص الخلایا المستنبته بانتظام: لقد فعلت الکثیر لحمایه خلایاک ولا ترید أن تلوث نفسک فی نهایه الثقافه! لذا ، اعتنی بمحاصیلک وشاهدها بانتظام.

على الرغم من أنه یمکنک على الأرجح حفظ محصولک باتباع الخطوات المذکوره أعلاه ، إلا أن الدقه والاتساق مع “أفضل الممارسات” هی بنفس الصعوبه. بهذه الطرق ، یمکنک فقط منع التلوث الکیمیائی وإلى حد ما التلوث البیولوجی. ومع ذلک ، عندما تبدأ البکتیریا فی مقاومه المضادات الحیویه ، فإنها لم تعد الحل الأفضل لمنع التلوث البیولوجی فی ثقافتک.