تلوث زراعه الأنسجه و 7 خطوات سهله للوقایه

التلوث مرة أخرى!

زراعة الأنسجة عملية طويلة وشاقة وتشعر بالانزعاج عندما تغزو الفطريات أو البكتيريا ثقافاتنا الحبيبة.

تتطلب زراعة الخلايا في المختبرات الكثير من الجهد ، من التحضير المتوسط ​​ونقل الخلايا إلى الصيانة الدورية. لسوء الحظ ، إذا أصيبت الخلايا وفقدت الثقافات ، فسيؤدي ذلك إلى إهدار الكثير من الوقت والجهد والمال. إذا كنت لا تعرف كيف يصاب محصولك ونوع التلوث به ، فإن المشكلة تصبح أكبر!

إنه أمر مدمر وليس لديك خيار سوى تكرار التجارب لحفظ بحثك.

أنواع تلوث زراعة الأنسجة

يصنف تلوث زراعة الأنسجة إلى مجموعتين: التلوث الكيميائي والتلوث البيولوجي.

التلوث الكيميائي

يحدث التلوث الكيميائي بسبب وجود أي مكونات غير حية تؤثر سلبًا على نمو محصولك.

مصادر وأنواع التلوث الكيميائي هي:

وسط المزرعة: يحتوي وسط استنبات الخلية على العناصر الغذائية والكواشف والماء ، وهي المصادر الرئيسية للتلوث.

المصل: مقوي مغذي لزراعة الخلايا. يحتوي على البروتين والهرمونات وبعض عوامل النمو التي تحفز نمو الأنسجة. ومع ذلك ، فإن التغيرات في تركيز الهرمونات وعوامل النمو يمكن أن تكون سامة لمزارع الخلايا.

الذيفان الداخلي: هو منتج ثانوي للبكتيريا سالبة الجرام ويوجد في الماء أو المصل أو مكونات المزرعة الأخرى. يمكن تحديده بواسطة طريقة Limulus Embocyte Lysate (LAL).

الأنابيب البلاستيكية وخزانات التخزين: يتم إطلاق المخلفات الكيميائية (المنظفات أو المطهرات) الموجودة في حاويات التخزين غير النظيفة في البيئة عند نقلها إلى الحاويات. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أن تؤثر الملينات أيضًا على نمو الثقافة.

ضوء الفلورسنت: يمكنه تنشيط بعض مكونات الوسائط مثل الريبوفلافين والتريبتوفان ، التي تطلق بيروكسيد الهيدروجين والجذور الحرة السامة للخلايا.

التلوث البيولوجي

يحدث التلوث البيولوجي بسبب وجود كائنات حية في الثقافة. وتشمل هذه الكائنات البكتيريا التي يسهل التعرف عليها ، والخمائر ، والعفن ، أو الفيروسات ، والبروتوزوا ، والميكوبلازما.

البكتيريا والخمائر والعفن موجودة في كل مكان في الطبيعة. لذلك ، يمكنهم بسهولة التسلل والاستعمار والنمو في مزارع الخلايا. تستخدم المضادات الحيوية لمنع البكتيريا من النمو ، ومع ذلك ، لا يزال بإمكان بعض السلالات المقاومة أن تنمو.

هناك بكتيريا صغيرة جدًا أو بطيئة النمو داخل الخلايا يصعب اكتشافها أثناء فحوصات المزرعة الروتينية. يمكن أن تسبب أضرارًا جسيمة للعديد من المحاصيل.

من الصعب تحديد الفيروسات والطفيليات والميكوبلازما الموجودة داخل الخلايا بطبيعتها. فهي لا تدمر ثقافة الخلية بأكملها فحسب ، بل إنها تشكل أيضًا مخاطر محتملة على صحة الإنسان.

ما هي أفضل طريقة لمنع التلوث؟

لتجنب التلوث وتوفير ثقافتك وتجاربك ، يجب عليك اتباع الاحتياطات الواردة أدناه “قبل وأثناء” تجارب زراعة الأنسجة:

ارتدِ القفازات ومعطف المختبر ونظّم نفسك: هل فكرت يومًا أنك قد تلوث خلاياك المزروعة بنفسك؟ نعم هذا صحيح! جسم الإنسان مليء بالبكتيريا. لذلك ، من الأفضل ارتداء القفازات ومعطف المعمل. يجب حفظها داخل المختبر وتنظيفها بانتظام. يمكنك أيضًا سرد الأشياء التي تحتاج إلى أخذها إلى غرفة المنشأة وسيساعدك هذا على إنهاء تجاربك في خطوة واحدة.

استخدم مواد كيميائية عالية الجودة: استخدم فقط وسائط وأمصال أصلية عالية الجودة في تجاربك. أيضا ، يجب تعقيم الماء ووسط الثقافة بشكل جيد.

تعقيم معدات المختبر: دائمًا معدات مختبر الأوتوكلاف ، مثل رؤوس الماصة ، وحاويات التخزين ، والأكواب ، والملقط ، إلخ. قبل ذلك ، تأكد من أن أجهزتك قابلة للتعقيم!

تحقق من المرافق: قم بتنظيف وتعقيم المرفق أو الغرفة التي تزرع فيها الخلايا بانتظام. تحقق أيضًا من التدفق الصفحي والحاضنات. نظف السطح الرقائقي والمعدات الأخرى بنسبة 70٪ كحول قبل إجراء الاختبار.

فحص الخلايا المستوردة: إذا كنت تقوم باستيراد خلايا من شركة أو مختبرات أخرى ، فمن الأفضل فحص الخلية عن طريق استزراعها لمدة أسبوعين على الأقل. يساعدك هذا على توفير الكواشف والجهد قبل زراعة الخلايا على نطاق واسع.

تجنب تعريض الخلايا لبيئات غير معقمة: حاول دائمًا الاحتفاظ بالخلايا في بيئة معقمة. يجب أن يكون نقل الخلايا من الحاضنة إلى الغطاء سريعًا. إذا كانت خلاياك خارج المنزل لفترة طويلة ، فاحتفظ بها في غطاء آخر. سيساعدك هذا في الحفاظ على محاصيلك الأخرى أيضًا.

افحص الخلايا المستنبتة بانتظام: لقد فعلت الكثير لحماية خلاياك ولا تريد أن تلوث نفسك في نهاية الثقافة! لذا ، اعتني بمحاصيلك وشاهدها بانتظام.

على الرغم من أنه يمكنك على الأرجح حفظ محصولك باتباع الخطوات المذكورة أعلاه ، إلا أن الدقة والاتساق مع “أفضل الممارسات” هي بنفس الصعوبة. بهذه الطرق ، يمكنك فقط منع التلوث الكيميائي وإلى حد ما التلوث البيولوجي. ومع ذلك ، عندما تبدأ البكتيريا في مقاومة المضادات الحيوية ، فإنها لم تعد الحل الأفضل لمنع التلوث البيولوجي في ثقافتك.